商品属性:
产品名称 | 规格 | 保存条件 | 货号 |
GV3101感受态细胞 |
10×100 μl、50×100 μl、100×100 μl、10 μl |
-80℃(12个月) |
EY-01G98525 |
商品详细说明:
操作方法:
取-80℃保存的农杆菌感受态于室温或手心片刻待其部分融化,处于冰水混合状态时插入冰中。
每100 μl感受态加入0.01-1 μg质粒DNA(转化效率较高,第一次使用前最好做预实验确定所加质粒的量),用手拨打管底混匀,依次于冰上静置5分钟、液氮5分钟、37℃水浴5分钟、冰浴5分钟。
加入700 μl无抗生素的LB或YEB液体培养基,于28℃振荡培养2~3小时。
6000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培养箱培养2-3天(当平板只含有50 μg/ml kan 时,28℃培养48 h即可;平板中同时加入50 μg/ml kan,20 μg/ml rif 时,需28℃培养60 h;如果使用的平板含有50 μg/ml rif 则需要28℃培养72-90 h)。
注意事项:
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